Набор для диагностики респираторного микоплазмоза птиц в РА

Набор предназначен для выявления гуморальных антител к возбудителю респираторного микоплазмоза птиц (M.gallisepticum) с целью определения степени инфицирования стада птиц и оценки напряженности поствакцинального иммунитета. В угрожаемых и неблагополучных по микоплазмозу хозяйствах исследуют сыворотки от 1-5% поголовья птичника (но не менее чем от 25 голов) в возрасте старше 1 мес. Использование набора позволяет ветеринарным специалистам своевременно и четко контролировать эпизоотическую ситуацию по респираторному микоплазмозу в хозяйстве и, в случае необходимости, принимать необходимые меры профилактики и борьбы. Набор зарегистрирован в Российской Федерации.

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора для диагностики респираторного микоплазмоза птиц в реакции агглютинации ( РА )

( Организация - производитель: ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии г. С-Петербург, Ломоносов)

I. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1.Набор для диагностики респираторного микоплазмоза птиц в реакции агглютинации (РА ). 2.В состав набора входят:

  • инактивированный антиген М.gallisepticum штамм «S6», объем 10,0 см3 - 1 флакон;
  • гипериммунная сыворотка крови кур к М. gallisepticum штамм «S6» (положительный контроль), лиофилизированная, объем 1,0 см3 -1 ампула;
  • нормальная сыворотка крови кур (отрицательный контроль) лиофилизированная, не содержащая антител к М. gallisepticum штамм «S6», объем 1,0см3 - 1 ампула.

3. По внешнему виду инактивированный антиген M.gallisepticum представляет собой прозрачную жидкость синего цвета с фиолетовым оттенком. Допускается выпадение осадка, при встряхивании легко разбивающегося в гомогенную взвесь. Нормальная и гипериммунная сыворотка крови представляют собой сухую пористую массу беловато-желтого цвета с розовым оттенком. 4.Компоненты наборов расфасованы в стеклянные ампулы и флаконы соответствующей вместимости. Ампулы запаяны, а флаконы герметично укупорены резиновыми пробками и укрепленными алюминиевыми колпачками. 5. На флаконах (ампулах) должна быть этикетка с указанием: наименования организации-производителя и ее товарного знака, наименования компонента, объема компонента (в см3), номера серии и контроля, даты изготовления (мес., год), срока годности (мес., год), знака соответствия, обозначения СТО. 6. Флаконы (ампулы) с компонентами упаковывают в картонные коробки с разделительными перегородками, обеспечивающими их целостность и неподвижность. В каждую коробку вкладывают инструкцию по применению набора. 7. На коробке должна быть этикетка, на которой указывают: полное наименование организации – производителя, ее адрес и телефон, товарный знак, название набора, количество флаконов (ампул) в коробке, номер серии и контроля, дату изготовления (мес., год), срок годности (мес., год), условия хранения, знак соответствия, обозначение СТО, надпись «Для животных». В каждую коробку вкладывают Инструкцию по применению набора. 8. Срок годности набора 18 месяцев с даты изготовления при условии хранения и транспортировки в сухом темном месте при температуре 2-8 0С. По истечении срока годности набор к применению не пригоден. 9. При нарушении целостности укупорки ампул (флаконов), изменении цвета их содержимого, наличии плесени и посторонних примесей, при низкой растворимости, при отсутствии этикеток, а также в случае не использования в пределах срока годности, компоненты набора выбраковывают. Компоненты набора не токсичны. Утилизация наборов не требует специальных мер безопасности.

II. ПРИНЦИП РЕАКЦИИ

10. Принцип реакции агглютинации основан на специфическом взаимодействии антител, содержащихся в сыворотке крови птиц с антигеном М.gallisepticum с образованием визуально определяемого комплекса антиген-антитело.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА

11. Набор предназначен для выявления антител к возбудителю респираторного микоплазмоза птиц (M.gallisepticum) в сыворотках крови кур с целью определения степени инфицирования стада и оценки напряженности поствакцинального иммунитета. В угрожаемых и неблагополучных по микоплазмозу хозяйствах исследуют сыворотки, полученные от 1-5% поголовья птичника (но не менее чем от 25 голов) в возрасте старше 1 мес. 12. Подготовка к работе. В ампулы (флаконы) с лиофилизированными сыворотками (положительный и отрицательный контроль) добавляют дистиллированную воду (рН 6,9±0,2) до их исходного объема, указанного на этикетке. Содержимое ампул должно полностью раствориться в течение 2-3 мин. Подготовленные к постановке реакции сыворотки можно хранить при температуре 2-8 0С не более 7 суток. Замораживание не допускается. Флаконы с антигеном перед применением тщательно встряхивают. Для контроля специфичности антигена на чистое обезжиренное предметное стекло с помощью глазных или мерных пипеток наносят по 2 капли (0,1 см3) контрольных сывороток, добавляют равный объем антигена и тщательно перемешивают стеклянной палочкой или покачиванием стекла. Можно использовать грелку-качалку. Реакцию проводят при температуре 20-30оС. Предметное стекло с нанесенными на него компонентами располагают на освещенной снизу матовой горизонтальной поверхности или зеркале, освещенном сбоку. Антиген используют для исследования полевых сывороток, если в течение первых трех минут в пробе с положительным контролем отмечают образование хлопьев (агглютината) и наступает просветление жидкости. В случае отсутствия или временной задержки образования агглютината, а также наличия положительной реакции в отрицательном контроле антиген к применению не пригоден. Проверку специфичности антигена проводят непосредственно перед началом исследования в РА полевых проб сыворотки крови. 13. Исследование полевых сывороток РА. 13.1. Получение сыворотки крови Для получения сыворотки крови у птиц берут кровь из подкрыльцовой вены или путем скарификации гребня в объеме 1,0-2,0 см3 в чистые пробирки, предварительно увлажненные физиологическим раствором. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок пробирки тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают 12-18 ч при комнатной температуре (18-20°С) или при температуре 37ºС (в термостате) в течение 60 мин, а затем 8-10 ч при температуре от 2ºС до 8ºС. Отстоявшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследуют в РА. При необходимости хранения сывороток более 3-х суток до начала исследований их консервируют азидом натрия в конечной концентрации 0,1% или мертиолятом (тимерсалом) в соотношении 1:20000 и помещают в холодильник при 2-8оС или замораживают при максимально низкой температуре. Постановку РА с полевыми сыворотками крови проводят согласно п.12

IV.МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

14. При работе с диагностическим набором следует соблюдать общие правила асептики, личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с ветеринарными препаратами. 15. Запрещается прием пищи и воды, курение в помещении, где проводятся работы с компонентами набора. 16. Набор компонентов следует хранить в местах, недоступных для детей.